Fosfatiniu buferiniu tirpalu. OFS.1.3.0003.15 Buferiniai tirpalai. Kai kurių reagentų paruošimas

Vietoj GFXII, 1 dalis, OFS 42-0072-07

Ieškokite buferinių sprendimų sąraše CTRL + F

Norint sėkmingai atlikti daugelį farmakopėjos testų ir kiekybinių bei kokybinių analizės procedūrų, reikia koreguoti arba išlaikyti tam tikrą pH vertę naudojant buferinius tirpalus.

Buferiniai tirpalai-tai tirpalai, turintys tam tikrą vandenilio jonų koncentraciją (pH), turintys konjuguotos rūgšties ir bazės porą, kuri užtikrina jų pH vertės stabilumą šiek tiek pasikeitus koncentracijai arba pridedant nedidelį kiekį rūgšties ar bazės.

Buferiniai tirpalai yra sistemos, kuriose tam tikras jonas yra pusiausvyroje su medžiagomis, galinčiomis surišti ar išlaisvinti tą joną. Buferiniai tirpalai gali išlaikyti tam tikro jono aktyvumą ir pridėti medžiagų, kurios, tikimasi, pakeis to jono aktyvumą.

Farmakologinėje analizėje naudojamos rūgščios buferinės sistemos (silpnos rūgšties ir jos druskos tirpalas) ir bazinės buferinės sistemos (silpnos bazės ir jos druskos tirpalas). Tokių mišinių pH mažai kinta, kai skiedžiamas gana plačiame diapazone (1: 100), taip pat pridedant nedidelį kiekį stiprių rūgščių ar bazių.

Buferiniam tirpalui būdinga sukurto pH vertė ir buferio talpa. Sistemos buferinė talpa nustatoma pagal rūgščių arba bazių molių skaičių (gramų ekvivalentais 1 litre), į kurį įpilant, 1 litro (dm 3) buferinio tirpalo pH pasikeičia 1 pH vienetu. Buferinio tirpalo talpa reguliuojama buferinių medžiagų koncentracija.

Buferiniai tirpalai naudojami jonų aktyvumui nustatyti ir palaikyti siaurame pH diapazone.

Buferiniai tirpalai dažniausiai naudojami:

a) kalibruoti pH metrus;

b) taikant analitinius metodus;

c) pasiekti izotoniškumą ruošiant skystas vaisto formas;

d) išlaikyti vaisto formų stabilumą.

Buferinės sistemos komponentai cheminės analizės tikslais turi būti suderinami su analite ir naudojamais reagentais. Buferiniai ir buferiniai tirpalai ruošiami išgrynintame vandenyje. Chromatografijai taip pat galite naudoti distiliuotą vandenį ir vandenį. Po paruošimo buferinis tirpalas ir buferiniai tirpalai turi būti kruopščiai sumaišyti.

Buferinis acetono tirpalas

8,15 g natrio acetato ir 42,0 g natrio chlorido ištirpinama vandenyje, įpilama 68,0 ml 0,1 M druskos rūgšties tirpalo, 150 ml acetono ir praskiedžiama vandeniu iki 500,0 ml.

Buferinis tirpalas, pH 2,0

6,57 g kalio chlorido ištirpinama vandenyje, įpilama 119,0 ml 0,1 M druskos rūgšties tirpalo ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 2,0

8,95 g dinatrio vandenilio fosfato ir 3,40 g kalio divandenilio fosfato ištirpinkite vandenyje ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml. PH koncentruota fosforo rūgštimi potenciometriškai sureguliuojamas iki 2,0.

Sulfato buferinis tirpalas, pH 2,0

132,1 g amonio sulfato ištirpinama vandenyje, praskiedžiama vandeniu (I tirpalas) iki 500,0 ml.

Atsargiai, nuolat aušinant ir maišant, į 400,0 ml vandens įpilama 14 ml koncentruotos sieros rūgšties; atvėsinama ir praskiedžiama vandeniu (II tirpalas) iki 500,0 ml.

Sumaišykite vienodus I ir II tirpalų kiekius; jei reikia, I arba II tirpalu potenciometriškai sureguliuokite pH iki 2,0.

Buferinis tirpalas, pH 2,5

100,0 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama 800 ml vandens, koncentruota druskos rūgštimi potenciometriškai nustatomas pH iki 2,5 ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

Buferinis tirpalas, pH 2,5 (1)

4,9 g 10% praskiestos fosforo rūgšties sumaišoma su 250 ml vandens, praskiestu 8,5% natrio hidroksido tirpalu pH nustatomas iki 2,5 potenciometriškai, o tirpalo tūris praskiedžiamas vandeniu iki 500,0 ml.

Buferinis tirpalas, pH 3,0

21,0 g citrinos rūgšties ištirpinama 200,0 ml 1 M natrio hidroksido tirpalo ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

40,3 ml gauto tirpalo supilama į 100,0 ml 0,1 M druskos rūgšties tirpalo.

0,25 mlncitrato buferinis tirpalas, pH 3,0

4,8 g citrinos rūgšties ištirpinama 80,0 ml vandens. Potenciometriškai 1 M natrio hidroksido tirpalu nustatykite pH iki 3,0 ir praskieskite vandeniu iki 100,0 ml.

0,1 mlnfosfato buferinis tirpalas, pH 3,0

12,0 g bevandenio natrio divandenilio fosfato ištirpinama vandenyje. Potenciometriškai 10% praskiestos fosforo rūgšties nustatykite pH iki 3,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 3,0

0,7 ml koncentruotos fosforo rūgšties sumaišoma su 100 ml vandens ir tirpalo tūris praskiedžiamas vandeniu iki 900,0 ml. Koncentruotu natrio hidroksido tirpalu nustatykite pH iki 3,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 3,0 (1)

3,40 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama 900 ml vandens. Koncentruota fosforo rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 3,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 3,2

900,0 ml 4 g / l natrio divandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 100 ml 2,5 g / l koncentruoto fosforo rūgšties tirpalo. Jei reikia, pH nustatykite iki 3,2 potenciometriškai natrio divandenilio fosfato arba koncentruotos fosforo rūgšties tirpalu.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 3,2 (1)

Naudojant 10% praskiestos fosforo rūgšties, pH nustatoma iki 3,2 potenciometriškai 35,8 g / l dinatrio vandenilio fosfato tirpalo.

100,0 ml gauto tirpalo praskiedžiama vandeniu iki 2000,0 ml tūrio.

Buferinis tirpalas, pH 3,5

25,0 g amonio acetato ištirpinama 25,0 ml vandens, įpilama 38,0 ml 25% druskos rūgšties. Jei reikia, pH potenciometriškai sureguliuokite iki 3,5 druskos rūgšties, praskiestos 7,3% arba 10% amoniako tirpalu, ir praskieskite vandeniu iki 100,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 3,5

68,0 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama vandenyje, pH koncentruota fosforo rūgštimi potenciometriškai sureguliuojamas iki 3,5. Tirpalo tūris praskiedžiamas vandeniu iki 1000,0 ml.

Buferinis tirpalas, pH 3,6

250,0 ml 0,2 M kalio vandenilio ftalato tirpalo sumaišoma su 11,94 ml 0,2 M druskos rūgšties tirpalo ir tirpalo tūris praskiedžiamas vandeniu iki 1000,0 ml.

Buferinis tirpalas, pH 3,7

15,0 ml praskiestos 30% acto rūgšties sumaišoma su 60,0 ml 96% alkoholio ir 20,0 ml vandens. Amoniako tirpalu potenciometriškai nustatykite pH iki 3,7 ir praskieskite vandeniu iki 100,0 ml.

Buferinis vario sulfato tirpalas, pH 4,0

0,25 g vario (II) sulfato ir 4,5 g amonio acetato ištirpinama praskiestoje 12% acto rūgštyje ir praskiedžiama tuo pačiu tirpikliu iki 100,0 ml.

Acetato buferinis tirpalas, pH 4,4

136,0 g natrio acetato ir 77,0 g amonio acetato ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml; įpilama 250,0 ml ledinės acto rūgšties ir išmaišoma.

Ftalato buferinis tirpalas, pH 4,4

2,042 g kalio hidroftalato ištirpinama 50,0 ml vandens, įpilama 7,5 ml
0,2 M natrio hidroksido tirpalo ir praskiedžiama vandeniu iki 200,0 ml tūrio.

0,05 mlnfosfato buferinis tirpalas, pH 4,5

6,80 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama 1000,0 ml vandens.

Acetato buferinis tirpalas, pH 4,5

77,1 g amonio acetato ištirpinama vandenyje, įpilama 70,0 ml ledinės acto rūgšties ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

Natrio acetato buferinis tirpalas, pH 4,5

63,0 g bevandenio natrio acetato ištirpinama vandenyje, įpilama 90,0 ml praskiestos 30% acto rūgšties. 30% praskiesta acto rūgštimi pH nustatomas iki 4,5 potenciometriškai, o tirpalo tūris praskiedžiamas vandeniu iki 1000,0 ml.

Acetato buferinis tirpalas, pH 4,6

5,4 g natrio acetato ištirpinama 50,0 ml vandens, įpilama 2,4 g ledinės acto rūgšties ir praskiedžiama vandeniu iki 100,0 ml; jei reikia, pH nustatykite iki 4,6 potenciometriškai ledine acto rūgštimi.

Sukcinato buferinis tirpalas, pH 4,6

11,0 g gintaro rūgšties ištirpinama 600,0 ml vandens ir 82,0 ml 1 M natrio hidroksido tirpalo mišinyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

Acetato buferinis tirpalas, pH 4,7

136,1 g natrio acetato ištirpinama 500,0 ml vandens. 250,0 ml gauto tirpalo sumaišoma su 250,0 ml praskiestos 12%acto rūgšties. Du kartus suplakti su ką tik paruoštu, filtruotu 0,1 g / l ditizono tirpalu chloroforme. Kratoma anglies tetrachloridu, kol ekstraktas pakeis spalvą. Vandeninis sluoksnis filtruojamas, kad pašalintų anglies tetrachlorido pėdsakus.

Acetato buferinis tirpalas, pH 5,0

Į 120,0 ml 6,0 g / l ledinės acto rūgšties tirpalo pridedama 100,0 ml 0,1 M kalio hidroksido tirpalo ir 250,0 ml vandens ir maišoma. Potenciometriškai nustatykite pH iki 5,0 su 6 g / l ledinės acto rūgšties tirpalu arba 0,1 M kalio hidroksido tirpalu ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Citrato buferinis tirpalas, pH 5,0

20,1 g citrinos rūgšties ir 8,0 g natrio hidroksido ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml. Potenciometriškai nustatykite pH iki 5,0, naudojant 7,3%praskiestos druskos rūgšties.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 5,0

2,72 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama 800,0 ml vandens. Potenciometriškai 1 M kalio hidroksido tirpalu nustatykite pH iki 5,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Buferinis tirpalas, pH 5,2

1,02 g kalio vandenilio ftalato ištirpinama 30,0 ml 0,1 M natrio hidroksido tirpalo ir praskiedžiama vandeniu iki 100,0 ml.

0,067 mlnfosfato buferinis tirpalas, pH 5,4

Reikalingi 23,99 g / l dinatrio vandenilio fosfato tirpalo ir 9,12 g / l natrio divandenilio fosfato monohidrato tirpalo tūriai sumaišomi, kad būtų pasiektas 5,4 pH. Potenciometriškai sureguliuokite pH iki 5,4.

Buferinis tirpalas, pH 5,5

54,4 g natrio acetato ištirpinama 50,0 ml vandens, jei reikia, pašildoma iki 35 ° C temperatūros. Atvėsinus gautą tirpalą, į jį lėtai įpilama 10,0 ml bevandenės acto rūgšties, maišoma ir tirpalo tūris pripildomas vandeniu iki 100,0 ml.

Acetato-edetato buferinis tirpalas, pH 5,5

250,0 g amonio acetato ir 15,0 g natrio edetato ištirpinama 400,0 ml vandens ir įpilama 125,0 ml ledinės acto rūgšties.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 5,5

I tirpalas. Ištirpinkite vandenyje 13,61 g kalio divandenilio fosfato ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

II sprendimas. 35,81 g dinatrio vandenilio fosfato ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

96,4 ml I tirpalo ir 3,6 ml II tirpalo sumaišoma.

Fosfato-citrato buferinis tirpalas, pH 5,5

56,85 ml 28,4 g / l bevandenio dinatrio vandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 43,15 ml 21,0 g / l citrinos rūgšties tirpalo.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 5,8

1,19 g dinatrio vandenilio fosfato dihidrato ir 8,25 g kalio divandenilio fosfato ištirpinkite vandenyje ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Acetato buferinis tirpalas, pH 6,0

100,0 g amonio acetato ištirpinama 300,0 ml vandens, įpilama 4,1 ml ledinės acto rūgšties. Jei reikia, sureguliuokite pH iki 6,0 amoniako arba 30% praskiestos acto rūgšties tirpalu ir praskieskite vandeniu iki 500,0 ml.

Dietilamonio fosfato buferinis tirpalas, pH 6,0

68,0 ml koncentruotos fosforo rūgšties atsargiai praskiedžiama vandeniu iki 500,0 ml. 25,0 ml gauto tirpalo sumaišoma su 450,0 ml vandens ir 6,0 ml dietilamino. Jei reikia, pH potenciometriškai nustatykite (6 ± 0,05) dietilaminu arba koncentruota fosforo rūgštimi ir praskieskite vandeniu iki 500,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 6,0

63,2 ml 71,5 g / l dinatrio vandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 36,8 ml 21 g / l citrinos rūgšties tirpalo.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 6,0 (1)

6,8 g natrio divandenilio fosfato ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml. Koncentruotu natrio hidroksido tirpalu potenciometriškai nustatykite pH iki 6,0.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 6,0 (2)

250,0 ml 0,2 M kalio divandenilio fosfato tirpalo sumaišyti su 28,5 ml 0,2 M natrio hidroksido tirpalo ir praskiesti vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 6,4

2,5 g dinatrio vandenilio fosfato, 2,5 g natrio divandenilio fosfato ir 8,2 g natrio chlorido ištirpinama 950,0 ml vandens. Jei reikia, 1 M natrio hidroksido tirpalu arba 1 M druskos rūgšties tirpalu potenciometriškai nustatykite pH iki 6,4 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 6,4 (1)

1,79 g dinatrio vandenilio fosfato, 1,36 g kalio divandenilio fosfato ir 7,02 g natrio chlorido ištirpinkite vandenyje ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

0,5 mlnftalato buferinis tirpalas, pH 6,4

100,0 g kalio vandenilio ftalato ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml. PH koncentruotu natrio hidroksido tirpalu potenciometriškai sureguliuojamas iki 6,4.

Buferinis tirpalas, pH 6,5

Vandenyje ištirpinama 60,5 g dinatrio vandenilio fosfato ir 46,0 g kalio divandenilio fosfato, įpilama 100,0 ml 0,02 M natrio edetato tirpalo, 20 mg gyvsidabrio (II) chlorido ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 6,5

2,75 g natrio divandenilio fosfato ir 4,5 g natrio chlorido ištirpinama 500 ml vandens. Potenciometriškai pH sureguliuokite iki 6,5 fosfatinio buferinio tirpalo, kurio pH 8,5.

0,1 mlnfosfato buferinis tirpalas, pH 6,5

13,80 g natrio -vandenilio fosfato monohidrato ištirpinama 900,0 ml vandens. Naudojant koncentruotą natrio hidroksido tirpalą, potenciometriškai nustatomas pH iki 6,5 ir tirpalo tūris praskiedžiamas vandeniu iki 1000,0 ml.

Imidazolo buferinis tirpalas, pH 6,5

6,81 g imidazolo, 1,23 g magnio sulfato ir 0,73 g kalcio sulfato ištirpinama 752 ml 0,1 M druskos rūgšties tirpalo. Jei reikia, 0,1 M druskos rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 6,5 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 6,6

250,0 ml 0,2 M vandenilio fosfato tirpalo sumaišyti su 89,0 ml 0,2 M natrio hidroksido tirpalu ir praskiesti vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfatiniu buferiniu tirpalu pH 6,8

1,0 g kalio divandenilio fosfato, 2,0 g dikalio vandenilio fosfato ir 8,5 g natrio chlorido ištirpinama 900 ml vandens. Jei reikia, 0,1 M druskos rūgštimi arba 0,1 M natrio hidroksidu potenciometriškai nustatykite pH iki 6,8 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 6,8

77,3 ml 71,5 g / l dinatrio vandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 22,7 ml 21 g / l citrinos rūgšties tirpalo.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 6,8 (1)

51,0 ml 27,2 g / l kalio divandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 49,0 ml 71,6 g / l dinatrio vandenilio fosfato tirpalo. Jei reikia, potenciometriškai pH sureguliuokite iki 6,8, naudodami pradinį kalio divandenilio fosfato arba dinatrio vandenilio fosfato tirpalą.

1 mlntris hidrochlorido buferinis tirpalas, pH 6,8

60,6 g tris (hidroksimetil) aminometano ištirpinama 400 ml vandens, koncentruota druskos rūgštimi potenciometriškai nustatomas pH iki 6,8 ir praskiedžiama vandeniu iki 500,0 ml.

Maleato buferinis tirpalas, pH 7,0

10,0 g natrio chlorido, 6,06 g tris (hidroksimetil) aminometano ir 4,90 g maleino anhidrido ištirpinama 900,0 ml vandens. Potenciometriškai nustatykite pH iki 7,0 170 g / l natrio hidroksido tirpalu ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Laikyti 2–8 laipsnių temperatūroje.

82,4 ml 71,5 g / l dinatrio vandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 17,6 ml 21 g / l citrinos rūgšties tirpalo.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 7,0 (1)

250,0 ml 0,2 M kalio divandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 148,2 ml 8 g / l natrio hidroksido tirpalo. Jei reikia, pradiniu kalio divandenilio fosfato arba natrio hidroksido tirpalu potenciometriškai nustatykite pH iki 7,0 ir praskieskite tirpalo tūrį vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 7,0 (2)

50,0 ml 136 g / l kalio divandenilio fosfato tirpalo sumaišyti su 29,5 ml 1 M natrio hidroksido tirpalo, praskiesti vandeniu iki 100,0 ml. PH sureguliuojamas iki 7,0 potenciometriškai, naudojant pradinį kalio divandenilio fosfato arba natrio hidroksido tirpalą.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 7,0 (3)

5,0 g kalio divandenilio fosfato ir 11,0 g dikalio vandenilio fosfato ištirpinama 900,0 ml vandens. Potenciometriškai pH nustatomas iki 7,0, naudojant 10% fosforo rūgšties arba 8,5% praskiesto natrio hidroksido tirpalo ir tirpalo tūris praskiedžiamas vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 7,0 (4)

28,4 g bevandenio dinatrio vandenilio fosfato ir 18,2 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 500,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 7,0 (5)

28,4 g bevandenio dinatrio vandenilio fosfato ištirpinama 800,0 ml vandens. Potenciometriškai 30% fosforo rūgšties tirpalu nustatykite pH iki 7,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

0,025 mlnfosfato buferinis tirpalas, pH 7,0

1 tūris 0,063 M fosfatinio buferio, pH 7,0, sumaišomas su 1,5 tūrio vandens.

0,03 mlnfosfato buferinis tirpalas, pH 7,0

5,2 g dikalio vandenilio fosfato ištirpinama 900,0 ml vandens. Koncentruota fosforo rūgštimi nustatykite pH iki 7,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

0,063 mlnfosfato buferinis tirpalas, pH 7,0

5,18 g bevandenio dinatrio vandenilio fosfato ir 3,65 g natrio divandenilio fosfato monohidrato ištirpinama 950,0 ml vandens. Koncentruota fosforo rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 7,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

0,067 fosfato buferinis tirpalas, pH 7,0

I. tirpalas. Vandenyje ištirpinama 0,908 g kalio divandenilio fosfato ir praskiedžiama vandeniu iki 100,0 ml.

II sprendimas. Vandenyje ištirpinama 2,38 g dinatrio vandenilio fosfato ir praskiedžiama vandeniu iki 100,0 ml.

38,9 ml I tirpalo sumaišoma su 61,1 ml II tirpalo; jei reikia, I arba II tirpalu potenciometriškai sureguliuokite pH iki 7,0.

0,1 mlnfosfato buferinis tirpalas, pH 7,0

1,361 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 100,0 ml. Potenciometriškai nustatykite pH iki 7,0 35 g / l dinatrio vandenilio fosfato tirpalu

Tetrabutilamonio buferinis tirpalas, pH 7,0

6,16 g amonio acetato ištirpinama 15,0 ml 400 g / l tetrabutilammonio hidroksido tirpalo ir 185,0 ml vandens mišinyje. Jei reikia, koncentruota azoto rūgštimi potenciometriškai sureguliuokite pH iki 7,0.

Buferinis tirpalas, pH 7,2

250,0 ml 0,2 M kalio divandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 175,0 ml 0,2 M natrio hidroksido tirpalo. 0,2 M kalio divandenilio fosfato tirpalu arba 0,2 M natrio hidroksido tirpalu potenciometriškai nustatykite pH iki 7,2 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 7,2

87,0 ml 71,5 g / l dinatrio vandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 13,0 ml 21 g / l citrinos rūgšties tirpalo.

Buferinis druskos tirpalas, pH 7,2

8,0 g natrio chlorido, 0,2 g kalio chlorido, 0,1 g bevandenio kalcio chlorido, 0,1 g magnio chlorido, 3,18 g dinatrio vandenilio fosfato ir 0,2 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml .

Fosfato-albumino buferinis druskos tirpalas, pH 7,2

10,75 g dinatrio vandenilio fosfato, 7,6 g natrio chlorido ir 10,0 g galvijų albumino ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml. Prieš pat naudojimą potenciometriškai sureguliuokite pH iki 7,2, atskiestu 8,5% natrio hidroksido tirpalu arba 10% praskiesta fosforo rūgštimi.

Fosfato-albumino buferinis druskos tirpalas, pH 7,2 (1)

10,75 g dinatrio vandenilio fosfato, 7,6 g natrio chlorido, 1,0 g galvijų albumino ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml. Prieš pat naudojimą potenciometriškai sureguliuokite pH iki 7,2, atskiestu 8,5% natrio hidroksido tirpalu arba 10% praskiesta fosforo rūgštimi.

Imidazolo buferinis tirpalas, pH 7,3

3,4 g imidazolo ir 5,8 g natrio chlorido ištirpinama vandenyje, įpilama 18,6 ml 1 M druskos rūgšties tirpalo ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml; jei reikia, 1 M druskos rūgštimi potenciometriškai sureguliuokite pH iki 7,3.

Buferinis tirpalas, pH 7,4

Vandenyje ištirpinama 0,6 g kalio divandenilio fosfato, 6,4 g dinatrio vandenilio fosfato ir 5,85 g natrio chlorido; jei reikia, 0,1 M druskos rūgšties arba 0,1 M natrio hidroksido tirpalo pH sureguliuojamas iki 7,4 potenciometriškai. tirpalo iki 1000,0 ml su vandeniu.

Barbital buferinis tirpalas, pH 7,4

50,0 ml tirpalo, kuriame yra 19,44 g / l natrio acetato ir 29,46 g / l barbitalio natrio, sumaišoma su 50,5 ml 0,1 M druskos rūgšties tirpalo, įpilama 20,0 ml 85 g / l natrio chlorido tirpalo ir praskiedžiama vandeniu iki 250,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 7,4

393,4 ml 0,1 M natrio hidroksido tirpalo sumaišoma su 250,0 ml 0,2 M kalio divandenilio fosfato tirpalo.

Tris (hidroksimetil) aminometanas - natrio chlorido buferinis tirpalas, pH 7,4

6,08 g tris (hidroksimetil) aminometano ir 8,77 g natrio chlorido ištirpinama 500 ml vandens, įpilama 10,0 g galvijų albumino. Koncentruota druskos rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 7,4 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Tris - natrio acetato buferinis tirpalas, pH 7,4

6,0 g tris (hidroksimetil) aminometano ir 4,9 g bevandenio natrio acetato ištirpinama 900,0 ml vandens. Koncentruota sieros rūgštimi nustatykite pH iki 7,4 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Tris - natrio acetatas - natrio chlorido buferinis tirpalas, pH 7,4

30,0 g tris (hidroksimetil) aminometano, 14,5 g bevandenio natrio acetato, 14,6 g natrio chlorido ištirpinama 900,0 ml vandens ir pridedama 0,50 g galvijų albumino. Koncentruota sieros rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 7,4 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Fosfatiniu buferiniu tirpalu pH 7,4

Vandenyje ištirpinkite 2,38 g dinatrio vandenilio fosfato, 0,19 g kalio divandenilio fosfato ir 8,0 g natrio chlorido; jei reikia, 0,1 M druskos rūgšties arba 0,1 M natrio hidroksido tirpalu potenciometriškai sureguliuokite pH iki 7,4 ir nustatykite tirpalo tūrį iki 1000,0 ml su vandeniu.

Borato buferinis tirpalas, pH 7,5

2,5 g natrio chlorido, 2,85 g natrio tetraborato ir 10,5 g boro rūgšties ištirpinama vandenyje, jei reikia, 0,1 M druskos rūgšties arba 0,1 M natrio hidroksido tirpalu pH sureguliuojamas iki 7,5 potenciometriškai ir nustatomas tirpalo tūris. iki 1000,0 ml su vandeniu.

Laikyti 2–8 laipsnių temperatūroje.

Buferis (HEPES) tirpalas, pH 7,5

2,38 g 2-etansulfono rūgšties ištirpinama 90 ml vandens. Potenciometriškai 20% natrio hidroksido tirpalu nustatykite pH iki 7,5 ir praskieskite vandeniu iki 100,0 ml.

0,2 mln

27,22 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama 930,0 ml vandens. Potenciometriškai 300 g / l kalio hidroksido tirpalu nustatykite pH 7,5 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

0,33 mlnfosfatiniu buferiniu tirpalu, pH 7,5

I. tirpalas. 119,31 g dinatrio vandenilio fosfato ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

II sprendimas. 45,36 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

85,0 ml I tirpalo sumaišoma su 15,0 ml II tirpalo; jei reikia, I arba II tirpalu potenciometriškai sureguliuokite pH iki 7,5.

Tris (hidroksimetil) aminometano buferinis tirpalas, pH 7,5

7,27 g tris (hidroksimetil) aminometano ir 5,27 g natrio chlorido ištirpinama vandenyje. Jei reikia, pH (7,5) potenciometriškai nustatykite tris (hidroksimetil) aminometano arba 0,1 M druskos rūgšties pradiniu tirpalu ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

0,05 mlnTris - hidrochlorido buferinis tirpalas, pH 7,5

6,057 g tris (hidroksimetil) aminometano ištirpinama vandenyje. Jei reikia, koncentruota druskos rūgštimi potenciometriškai sureguliuokite pH iki 7,5 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Natrio citrato buferinis tirpalas, pH 7,8 (0,034 M natrio citrato ir 0,101 M natrio chlorido tirpalo)

10,0 g natrio citrato ir 5,90 g natrio chlorido ištirpinama 900,0 ml vandens. Koncentruota druskos rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 7,8 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Buferinis tirpalas, pH 8,0

50,0 ml 0,2 M kalio divandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 46,8 ml 0,2 M natrio hidroksido tirpalo ir tirpalo tūris praskiedžiamas vandeniu iki 200,0 ml.

Buferinis tirpalas, pH 8,0 (1)

20,0 g dikalio vandenilio fosfato ištirpinama 900,0 ml vandens. Koncentruota fosforo rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 8,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

0,0015 mlnborato buferinis tirpalas, pH 8,0

0,572 g natrio tetraborato ir 2,94 g kalcio chlorido ištirpinama 800,0 ml vandens. 1 M druskos rūgštimi nustatykite pH iki 8,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

0,02 mln

50,0 ml 0,2 M kalio divandenilio fosfato tirpalo sumaišoma su 46,8 ml 0,2 M natrio hidroksido tirpalo ir tirpalo tūris praskiedžiamas vandeniu iki 500,0 ml.

0,1 mlnfosfato buferinis tirpalas, pH 8,0

Vandenyje ištirpinkite 0,523 g kalio divandenilio fosfato ir 16,73 g dikalio vandenilio fosfato ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

1 mlnfosfato buferinis tirpalas, pH 8,0

136,1 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama vandenyje. Potenciometriškai 1 M natrio hidroksido tirpalu nustatykite pH iki 8,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Tris - natrio acetato buferinis tirpalas, pH 8,0

6,0 g tris (hidroksimetil) aminometano ir 4,9 g bevandenio natrio acetato ištirpinama 900,0 ml vandens. Koncentruota sieros rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 8,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

1 mlntris - hidrochlorido buferinis tirpalas, pH 8,0

121,1 g tris (hidroksimetil) aminometano ir 1,47 g kalcio chlorido ištirpinama 900,0 ml vandens. Koncentruota druskos rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 8,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Tris - hidrochlorido buferinis tirpalas, pH 8,0

1,21 g tris (hidroksimetil) aminometano ir 29,4 mg kalcio chlorido ištirpinama vandenyje. Potenciometriškai 1 M druskos rūgštimi nustatykite pH iki 8,0 ir praskieskite vandeniu iki 100,0 ml.

Tris (hidroksimetil) aminometano buferinis tirpalas, pH 8,1

0,294 g kalcio chlorido ištirpinama 40,0 ml tris (hidroksimetil) aminometano 24,22 g / l tirpalo. Potenciometriškai 1 M druskos rūgštimi nustatykite pH iki 8,1 ir praskieskite vandeniu iki 100,0 ml.

Tris - glicino buferinis tirpalas, pH 8,3

6,0 g tris (hidroksimetil) aminometano ir 28,8 g glicino ištirpinama 500,0 ml vandens ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml. Prieš pat naudojimą 1 tūris paruošto tirpalo supilama į vandenį iki 10 tūrių.

Barbital buferinis tirpalas, pH 8,4

8,142 g barbitalinio natrio ir 0,287 g natrio acetato ištirpinama vandenyje, įpilama 90,0 ml 0,1 M druskos rūgšties ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

Tris -EDTABSAbuferinis tirpalas, pH 8,4

6,1 g tris (hidroksimetil) aminometano, 2,8 g natrio edetato, 10,2 g natrio chlorido ir 10,0 g galvijų albumino ištirpinama vandenyje. Potenciometriškai 1 M druskos rūgštimi nustatykite pH iki 8,4 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Tris (hidroksimetil) aminometanas -EDTAbuferinis tirpalas, pH 8,4

5,12 g natrio chlorido, 3,03 g tris (hidroksimetil) aminometano ir 1,40 g natrio edetato ištirpinama 250,0 ml vandens. Koncentruota druskos rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 8,4 ir praskieskite vandeniu iki 500,0 ml.

Fosfato buferinis tirpalas, pH 8,5

3,5 g dikalio vandenilio fosfato ir 4,5 g natrio chlorido ištirpinama 500,0 ml vandens. Potenciometriškai nustatykite pH iki 8,5, naudodami vienodo tūrio 10% praskiestos fosforo rūgšties ir vandens mišinį.

Tris - acetato buferinis tirpalas, pH 8,5

0,294 g kalcio chlorido ir 12,11 g tris (hidroksimetil) aminometano ištirpinama vandenyje. Potenciometriškai 30% praskiestos acto rūgšties nustatykite pH iki 8,5 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Tris - borato buferinis tirpalas su Trilon B, pH 8,6 - 8,8

60,5 g tris (hidroksimetil) aminometano, 6,0 g „Trilon B“, 19,0 g boro rūgšties nuosekliai ištirpinama vandenyje 1000,0 ml talpos matavimo cilindre, tirpalo tūris supilamas į vandenį iki žymės ir maišomas. . Jei reikia, tirpalas filtruojamas per popierinį filtrą. Tirpalas laikomas 2–8 ° C temperatūroje ne ilgiau kaip 3 mėnesius.

1,5 mlntris - hidrochlorido buferinis tirpalas, pH 8,8

90,8 g tris (hidroksimetil) aminometano ištirpinama 400 ml vandens. Koncentruota druskos rūgštimi potenciometriškai nustatykite pH iki 8,8 ir praskieskite vandeniu iki 500,0 ml.

Buferinis (fosfato) tirpalas, pH 9,0

1,74 g kalio divandenilio fosfato ištirpinama 80 ml vandens. Potenciometriškai 1 M kalio hidroksido tirpalu nustatykite pH iki 9,0 ir praskieskite vandeniu iki 100,0 ml.

Buferinis tirpalas, pH 9,0

Tirpalas I. 6,18 g boro rūgšties ištirpinama 0,1 M kalio chlorido tirpale ir tuo pačiu tirpikliu praskiedžiama iki 1000,0 ml.

II sprendimas. 0,1 M natrio hidroksido tirpalas.

1000,0 ml I tirpalo sumaišoma su 420,0 ml II tirpalo.

Buferinis tirpalas, pH 9,0 (1)

6,0 g boro rūgšties ištirpinama 500,0 ml vandens. Potenciometriškai pH sureguliuokite iki 9,0 1 M natrio hidroksido tirpalu (apie 41,5 ml) ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Amonio chlorido buferinis tirpalas, pH 9,5

33,5 g amonio chlorido ištirpinama 150,0 ml vandens, įpilama 42,0 ml 25% koncentruoto amoniako tirpalo ir praskiedžiama vandeniu iki 250,0 ml. Laikyti plastikinėje pakuotėje.

Amonio chlorido buferinis tirpalas, pH 10,0

5,4 g amonio chlorido ištirpinama 20,0 ml vandens, įpilama 35,0 ml amoniako tirpalo ir praskiedžiama vandeniu iki 100,0 ml.

Dietanolamino buferinis tirpalas, pH 10,0

96,4 g dietanolamino ištirpinama vandenyje, praskiedžiama vandeniu iki 400,0 ml, įpilama 0,5 ml 186 g / l magnio chlorido tirpalo. Potenciometriškai 1 M druskos rūgštimi nustatykite pH iki 10,0 ir praskieskite vandeniu iki 500,0 ml.

0,1 mlnamonio karbonato buferinis tirpalas, pH 10,3

7,91 g amonio karbonato ištirpinama 800,0 ml vandens. Praskiestu 8,5% natrio hidroksido tirpalu pH nustatomas potenciometriškai iki 10,3, o tirpalo tūris praskiedžiamas vandeniu iki 1000,0 ml.

Amonio chlorido buferinis tirpalas, pH 10,4

70,0 g amonio chlorido ištirpinama 200,0 ml vandens, įpilama 330,0 ml 25% koncentruoto amoniako tirpalo ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml. Jei reikia, potenciometriškai sureguliuokite pH iki 10,4 17% amoniako tirpalu.

Borato buferinis tirpalas 10.4

24,64 g boro rūgšties ištirpinama 900,0 ml vandens. 400 g / l natrio hidroksido tirpalu potenciometriškai nustatykite pH iki 10,4 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Buferinis tirpalas, pH 10,9

6,75 g amonio chlorido ištirpinama amoniako tirpale (žr. Bendrosios farmakopėjos monografiją „Reagentai. Rodikliai“) ir tirpalo tūris tuo pačiu tirpikliu praskiedžiamas iki 100,0 ml.

Jonų stiprumo reguliavimo buferis

Vandenyje ištirpinkite 58,5 g natrio chlorido, 57,0 ml ledinės acto rūgšties, 61,5 g natrio acetato ir 5,0 g cikloheksilendinitrilo tetraacto rūgšties ir praskieskite vandeniu iki 500,0 ml. 335 g / l natrio hidroksido tirpalu nustatykite pH iki 5,0–5,5 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Jonų stiprumo reguliavimo buferis (1)

A sprendimas. 210,0 g citrinos rūgšties ištirpinama 400,0 ml vandens. Potenciometriškai 25% koncentruoto amoniako tirpalo pH nustatomas iki 7,0 ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

(B) sprendimas. 132 g amonio fosfato ištirpinama vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000,0 ml.

C sprendimas. Į suspensiją, kurioje yra 292,0 g (etilendinitrilo) tetraacto rūgšties 500,0 ml vandens, įpilama 200,0 ml 25%koncentruoto amoniako tirpalo. Potenciometriškai 25% koncentruoto amoniako tirpalu nustatykite pH iki 6,0–7,0 ir praskieskite vandeniu iki 1000,0 ml.

Sumaišykite vienodus kiekius (a), (b), (c) tirpalų ir 25% koncentruoto amoniako tirpalu sureguliuokite pH iki 7,5.

PBS (fosfatiniu buferiniu tirpalu) yra dažniausiai naudojamas buferis imunohistocheminiam dažymui ir dažniausiai naudojamas biologiniams tyrimams. Osmosiškumo ir tirpalų jonų koncentracija atitinka žmogaus kūno koncentraciją (izotoninė).

PBS yra vandens pagrindu pagamintas tirpalas, kuriame yra natrio vandenilio fosfato, natrio chlorido ir kai kuriais atvejais kalio chlorido ir kalio divandenilio fosfato.

Imunofluorescencinis dažymas IHC

Imunofluorescencinis dažymas buvo pirmasis imunohistocheminis (IHC) dažymo metodas. Esant antigeno ir antikūno surišimo reakcijos pagrindui, antigenai tampa matomi naudojant fluorescencinius dažus, kai jie konjuguojami su antikūnais. Procesas vyksta, kai jį suaktyvina tam tikro bangos ilgio sužadinimo šviesa fluorescenciniu mikroskopu. Imunohistochemija reiškia antigenų (pvz., Baltymų) aptikimo procesą audinio pjūvio ląstelėse, naudojant antikūnų, kurie specifiškai jungiasi prie biologinių audinių antigenų, principą.

Fosfatiniu buferiniu tirpalu (PBS)

Fosfatinis buferinis druskos tirpalas gali būti naudojamas daug, nes jis yra izotoninis ir netoksiškas daugumai ląstelių. Jis gali būti naudojamas medžiagoms skiesti ir naudojamas indams su ląstelėmis skalauti. PBS gali būti naudojamas kaip skiediklis biomolekulių džiovinimo metoduose, nes jo viduje esančios vandens molekulės bus struktūros aplink medžiagą (pvz., Baltymą), kuri bus „išdžiovinta“ ir imobilizuota prie kieto paviršiaus.

Plona vandens plėvelė, kuri jungiasi prie medžiagos, apsaugo nuo denatūracijos ar kitų konformacinių pokyčių. Karbonatiniai buferiai gali būti naudojami tuo pačiu tikslu, tačiau mažiau efektyviai. PBS taip pat gali būti naudojamas atskaitos spektrui matuoti baltymų adsorbciją elipsometrijos metodu.

PBS paruošimas

Yra daug skirtingų PBS paruošimo būdų.

Kai kuriose formulėse nėra kalio, o kitose - kalcio ar magnio. Žemiau pateiktas buferio receptas, kuris yra gana paprastas, skirtas 10X PBS pradiniam tirpalui (0,1 M). Tai taip pat suteikia galimybę pridėti „Tween“. Visas procesas trunka apie 10 minučių.

Kaip pasigaminti fosfatiniu buferiniu tirpalu (PBS)

  1. Pasverkite: 10,9 g bevandenio dvibazio natrio fosfato (Na2HPO4), 3,2 g bevandenio natrio fosfato vienbazio (NaH2PO4) ir 90 g natrio chlorido (NaCl).
  2. Visa tai, kas išdėstyta pirmiau, ištirpinama tik 1 litre distiliuoto vandens.
  3. Nustatykite pH vertę iki 7,4.
  4. Praskiedžiama iki galutinio 1 l tūrio.
  5. (nereikalinga). Jei tirpalas turi 0,5% Tween 20, į 1 L tirpalą įpilkite 5 ml Tween 20.
  6. Prieš naudojimą praskieskite 10 kartų ir, jei reikia, sureguliuokite pH.
  • Laikyti kambario temperatūroje.
  • Reagentai be kojų gali būti pakeisti, tačiau turėsite perskaičiuoti atitinkamą kiekvieno masę, kad tilptų pridėtos vandens molekulės.

Ko jums reikia norint sukurti PBS buferį

  • Vienfazis natrio fosfatas (bevandenis)
  • Dvibazis natrio fosfatas (bevandenis)
  • Natrio chloridas
  • Svarstyklės ir svorio valtys
  • Magnetinis maišytuvas ir maišyklė> pH zondas, kalibruoti ir tinkami tirpalai pH koreguoti
  • 1 l matavimo kolba
  • Tween 20 (neprivaloma)

Fosfatiniu buferiniu tirpalu: 1 l 10X

apibūdinimas

PBS: 1 l 10X (fosfatiniu buferiniu tirpalu) yra koncentruotas buferinis tirpalas, paruoštas praskiesti 1X PBS darbiniu tirpalu, dažniausiai naudojamu biologiniuose tyrimuose. PBS buferis idealiai tinka palaikyti pastovų pH, ir kadangi jis yra izotoninis ir netoksiškas ląstelėms, jis gali būti naudojamas įvairiose biologinėse srityse. PBS dažnai naudojamas kaip plovimo ir skiedimo buferis, taip pat naudojamas atskaitos spektrui matuoti baltymų adsorbciją.

Naudojimas

Prieš naudojimą praskiedžiama 1X tirpalu ir filtruojama per 0,22 µm filtrą į sterilią kolbą. Padaro 10 litrų 1X PBS buferio, kurio fosfato buferio koncentracija yra 0,01 M, 0,027 M kalio chlorido, 0,137 M natrio chlorido ir 1,76 mM kalio fosfato. PBS tirpalo pH bus maždaug 7,4.
... Jei ląstelių kultūrai naudojamas buferis, gali prireikti tirpalo sterilizuoti. Iš anksto atskiestas buferis gali būti išpilstytas į alikvotines dalis ir sterilizuojamas autoklave (20 min., 121 ° C, skysčio ciklas).
... PBS galima laikyti kambario temperatūroje, tačiau nesterilus tirpalas gali būti laikomas šaldytuve, kad laikui bėgant būtų išvengta bakterijų augimo. Koncentruoti pradiniai tirpalai gali nusėsti, kai atvės, ir prieš naudojimą juos reikia laikyti kambario temperatūroje, kol nuosėdos visiškai ištirps.

Technine informacija

pH: Praskiedus iki 1X koncentracijos, pH bus ~ 7,4.
Sandėliavimas: Laikyti kambario temperatūroje
Sinonimas: Fosfatiniu buferiniu tirpalu
Taikymas: Buferinis tirpalas, dažniausiai naudojamas biologiniuose tyrimuose

Užsakymo informacija

Naudojimo sritis:Gamyba:Kalėdų Senelis
Metodas:
Tūris:1 l
Katė. kambarys:sc-24946
Kaina (su PVM 20%):pageidaujantĮ krepšelį
Pavadinimas: PBS buferis (fosfatiniu buferiniu tirpalu), 10X, 1L / fosfatiniu buferiniu tirpalu: 1 l 10X.
Pastaba: Rūšies specifika :.
Apibūdinimas: .
Taikymas:.
Pristatymas ant ledo mėlynos spalvos, laikymas kambario temperatūroje,

Taikymas

Natrio fosfato buferis yra plačiai naudojamas, nes jis yra izotoninis ir netoksiškas ląstelėms. PBS naudojamas medžiagoms ištirpinti, indams su ląstelėmis skalauti.

Paruošimas

Yra daug natrio fosfato buferio paruošimo būdų. Kai kuriose formulėse nėra kalio, kitose - kalcio ar magnio.

Norėdami paruošti 1 litrą vieno natrio fosfato buferio, naudokite:

  • 8,00 g NaCl
  • 0,20 g KCl
  • 1,44 g Na 2 HPO 4
  • 0,24 g KH 2 PO 4
  • ištirpinama 800 ml distiliuoto vandens
  • druskos rūgštimi arba natrio hidroksidu sureguliuokite pH iki 7,4
  • įpilkite distiliuoto vandens iki 1 litro.

Dešimt litrų 10 kartų PBS pradinio tirpalo galima paruošti ištirpinus 800 g NaCl, 20 g KCl, 144 g Na 2 HPO 4 ir 24 g KH 2 PO 4 aštuoniuose litruose distiliuoto vandens, padidinant tūrį iki dešimties litrų. Gauto tirpalo pH bus apie 6,8, bet praskiedus iki vieno karto PBS, jis bus lygus 7,4. Paruošę tirpalą, pH matuokliu patikrinkite pH vertę. Jei reikia, pH galima sureguliuoti druskos rūgštimi arba natrio hidroksidu.

Paprasčiausias natrio fosfato buferio paruošimo būdas yra naudoti parduodamas tablečių formas. Tokios tabletės praskiedžiamos distiliuotu vandeniu iki iš anksto nustatyto tūrio ir gaunamas iš anksto nustatytos koncentracijos tirpalas.

Ląstelių kultūroms tirpalas turi būti dalijamas į dalis ir sterilizuojamas autoklave (20 minučių 121 ° C temperatūroje, skysčio režimu). Sterilizuoti nereikia, atsižvelgiant į konkretų naudojimo būdą. Natrio fosfato buferį galima laikyti kambario temperatūroje, tačiau, siekiant užkirsti kelią bakterijų augimui, rekomenduojama ilgą laiką laikyti nesterilų buferį šaldytuve. Druskos koncentruotuose pradiniuose tirpaluose gali nusėsti, kai atvės, todėl prieš naudojimą koncentruotą tirpalą rekomenduojama pašildyti iki kambario temperatūros ir palaukti, kol nuosėdos visiškai ištirps.

Pastabos (redaguoti)

taip pat žiūrėkite


„Wikimedia Foundation“. 2010 m.